F-キット L-グルタミン酸

比色法

肉、魚、果物、野菜、スープ、スパイス、ソースなどの食品、医薬品、生体試料（血液など）中のL-グルタミン酸の測定。

分析物

L-グルタミン酸はほとんどの蛋白質に大量に存在し、そのナトリウム塩（グルタミン酸ソーダ、MSG）は調味科として汎用されます。

原理（文献1）

特異性

本法はL-グルタミン酸に特異的です。

感度と測定限界

測定感度は試料量（v）が2.000mlの時の0.005吸光度に基づいています。これは0.06ｍｇ/ｌ（試料溶液）のL-グルタミン酸濃度に相当します。0.2mg/lの測定限界は、最大試料量（v）が2.000mlの時の吸光度変化量0.020に由来します。

直線性

測定の直線性は0.4μg L-グルタミン酸/アッセイ（0.2mg L-グルタミン酸/l試科溶液：v=2.000ml）から14μg L-グルタミン酸/アッセイ（0.07g L-グルタミン酸/l試料溶液：v=0.200ml）の間にある。

正確性

一つの試料を二重測定した場合、0.005から0.010の吸光度の違いが起きます。標準偏差値は測定範囲内で約1～2％です。

細挽ポークソーセージの分析（4）:

x=0.13g/100g r=0.01g/100g S（r）=±0.0035g/100g
R=0.013g/100g S（R）=±0.0047g/100g

パルプの分析（4）:

r=0.08g/100g S（r）=±0.03g/100g
R=0.011g/100g S（R）=±0.04g/100g

干渉物/誤差の原因

高濃度のアンモニウムイオンは反応を遅くします。試料中の高濃度の還元物質（L-アスコルビン酸、亜硫酸）は、開始酵素（GlDH）の添加より前にクリープ反応を引き起こします。

キット内容

1. リン酸カリウム/トリエタノールアミンバッファー.pH8.6
2. 3×約4U ジアフォラーゼ.約28mg NAD
3. INT
4. 約1080 U GlDH
5. 測定のコントロール用L-グルタミン酸標準液
   （結果の計算には測定の必要はありません。）

試料調製の一般的情報

• 透明で、無色の実際的に中性の液体試料を直接、あるいは希釈後液量2.000mlまで使用してください。
• 濁った溶液はろ過してください。
• 二酸化炭素を含む試料は脱気（ろ過などで）してください。
• 酸性試料はNaOHやKOHでpHを約8に調整してください。
• 固形、半固形試料は砕くか、ホモジナイズし、水で抽出するか溶解してください。
• 蛋白質を含む試料は過塩素酸で除蛋白してください。
• 脂肪を含む試料は温水で抽出してください。

参考文献

1. Beutler, H.-O. (1985) in Methods of Enzymatic Analysis (Bergmeyer, H.U. ed.) 3rd ed., vol. VIII, pp. 369-376, Verlag Chemie, Weinheim, Deerfield Beach/Florida, Basel
2. International Standard (ISO) .4134: Meat and meat products-Determination of L-(+)-glutamic acid content (Reference method), (December 1978)
3. Bundesverband der Deutschen Feinkostindustrie e.V. Bonn, Analysenmethoden: Bestimmung der L-Glutaminsäure in Tomatenmark (enzymatische Methode) IV/71 (Dezember 1979)
4. Amtliche Sammlung von Untersuchungsverfahren nach §35 LMBG, Untersuchung von Lebensmitteln. Bestimmung von L-Glutaminsäure (L-Glutamat) in Fleisch-Erzeugnissen, L 07.00-17 (November 1981), Bestimmung von L-Glutaminsäure (L-Glutamat) in Wurstwaren, L 08.00-19 (November 1981); Bestimmung der L-Glutaminsäure in Tomatenmark, L 26.11.03-9 (Mai 1983): Bestimmung von L-Glutaminsäure in Tomatenketchup und vergleichbaren Erzeugnissen. L 52.01.01-9 (November 1983)
5. Schweizerisches Lebensmittelbuch, Kapitel 61B (Enzymatische Bestimmungen) /4.1 (1981), Kapitel 12 (Fleischextrakte, Bouillon-Präparate, Sulzen) /13 (1981), Kapitel 13 (Würzen, Suppen, Saucen) /12 (1981)
6. Gombocz, E., Hellwig, E., Vojir, F. & Petuely. F. (1981) Deutsche Lebensmittel-Rundschau 77, 4
7. Belgium: Enzymatische bepaling van glutaminzuur in verbruiksklare soepen, in voorkomend geval bereid vanaf soep-concentraten en/of soepen in droge vorm, volgens de gebruiksaanwijzing in de etikettering, Warenwetgeving (Maart 1983)
8. Nordisk Metodikkommittée för Livsmedel -Nordic Committee on Food Analysis, L-Glutaminsyra och Mononatrium-Glutamat, Enzymatisk Bestämning i Fisk- och Köttvaror samt i Soppor -L-Glutamic Acid and Monosodium Glutamate. Enzymatic Determination in Meat and Fish and in Soups, UDC 547.466.64:577.15: 637.5 No 138. 1991
9. Standard of the Russian Federation/Gosstandart Rossii GOST R 51198-98 (1998) Meat and meat products. Method for determination of L-(+)-glutamic acid content